Неудачные попытки ЭКО и пути их преодоления в практике ВРТ.
Неудачные попытки ЭКО и пути их преодоления в практике ВРТ.
Л.И. Покотило , Н К. Ковалева , Л.В Дудко.
Многопрофильная клиника « Семейный врач и Со» центр ЭКО ,
Актобе , Республика Казахстан
АННОТАЦИЯ
Предимплатационный генетический скрининг (ПГС) : сравнительная геномная гибридизация на матрице (СГГ,от англ.ArrayCGH) и секвенирование нового поколения (СНП,от англ.NGS)
Preimplantation genetic screening as a modern method of diagnosis and prognosis in ART programs.
L.I. Pokotilo, N.K. Kovaleva, L.V.Dudko.
Multidisciplinary clinic of "Family doctor and Co" LLP IVF center, Aktobe, IVF center Kazakhstan
SUMMARY
Preimplantation genetic screening :comparative genomic hybridization on a matrix (ArrayCGH) and next-generation sequencing (NGS)
Актуальность:
Важным аспектом клиники вспомогательных репродуктивных технологий ВРТ является оценка и мониторинг неудачных программ с целью получения беременности и рождения здорового ребенка .
Введение:
Критически важным для любой клиники вспомогательных репродуктивных технологий ВРТ является оценка и мониторинг неудачных программ.
Анализируя проведенные циклы в каждом конкретном случае, мы решили сравнить пациенток в возрастной группе от 30 до 48 лет с удачными попытками экстракорпорального оплодотворения ЭКО, ИКСИ после ПГС (aCGH ) и неудачными попытками после aCGH также выделили группу пациенток отказавшихся от проведения ПГС aCGH.[1]
Ключевые слова: экстракорпоральное оплодотворение , бесплодие, предимплатационный генетический скрининг, трисомия, моносомия, дисомия, анеуплоидии, вспомогательные репродуктивные технологии.
Цель исследования:
- Определить связь неудачных попыток ВРТ с проведением генетического тестирования aCGH и без него.
- Выяснить как влияет результат aCGH на качество имплантации и наступления беременности при подготовке к программам ВРТ.
Материалы и методы исследования:
Проведен репрезентативный анализ амбулаторных карт трёх групп пациентов. Использовались эмбриологические протоколы с оценками качества эмбрионов, протоколы переноса эмбрионов. Возраст обследуемых пациентов, был от 30 до 48 лет, средний составил ( 39 ±1,5года.) Все пациентки после диагностической гистероскопии получили лечение : физиолечение ( БТЛ, кавитация, ВЛОК), антибиотикотерапия.
В каждую группу взята выборка из 15- ти пациенток, одной возрастной категории, которым рекомендовано было aCGH .
1-ая группа без aCGH, пациенты по разным причинам, аргументировали отказ от этой процедуры.
2-ая группа неудачные попыток с aCGH.
3-ая группа ( контрольная) с удачными попытками с aCGH
В каждой из трех групп присуствовали факторы бесплодия: маточный- 67% ,трубно-перитонеальный - 47,5% , нарушение гормонального фона: ФСГ - повышение на 52%, ЛГ- снижение на 49,2% , эстрадиол повышение на 47,9%, пролактин повышение на 59%, тестостерон повышение на 18% , снижение овариального резерва по АМГ на 85,7%. Синдром СПКЯ-47,5%, тромбопатии той или иной степени -85,5%, АФС синдром -38,5%. сочетанные факторы - 93%. [2] Проводилась нами биосия эмбрионов на оборудовании «Integra» и биоптаты отправлялись согласно совместной программе, согласно договора в следующие клиники: генетическим центром «Progen» г.Москва , международным клиническим центром репродуктологии «Persona» г.Алматы, Институтом репродуктивной медицины «ИРМ» г .Алматы, за 2019-2022 г.г. смотри ( диаграммы1,2).
Результаты исследования:
На сегодняшний день хромосомные аномалии плода считаются главной причиной неудачных попыток ВРТ, в том числе самопроизвольного прерывания беременности и рождения детей с генетическими отклонениями.
По данным ВОЗ , риск женщины родить ребенка с в возрасте 30-ти лет с трисомией составляет 1 случай к 385, в возрасте 40 лет 1 случай к 63 и в возрасте 45 лет 1 случай к 19. При этом распространенность летальных хромосомных аномалий, приводящих к смерти плода еще выше : анеуплоидии (нарушение числа хромосом) которые в 25%-ти являются причиной всех спонтанных абортов, в частности аборты первого триместра составляли -50-60% . [3]
Если у молодых пациенток количество генетически здоровых эмбрионов составляет 80% от общего количества, то к 40-ка годам этот показатель снижается до 20% , а к 45-ти годам здоровых эмбрионов регистрируется всего 4-5%. [4]
Перечисленные риски в программах ВРТ помогают нам проводить отбор морфологически качественных эмбрионов. На основании приказа № 272 МЗ РК от 15 декабря 2020 года «Об утверждении правил и условий проведения вспомогательных репродуктивных методов и технологий» которым наша клиника руководствуется . В связи с этим, многократно увеличиваются шансы на успешную беременность и рождение здорового ребенка. .[5]
Статистический обзор aCGH -исследований, проведен нами совместно с медико-генетическим центром «Progen» г.Москва , международным клиническим центром репродуктологии «Persona» г.Алматы, Институтом репродуктивной медицины «ИРМ» г.Алматы, за 2019-2022 г.г. смотри ( диаграммы1,2).
Следует отметить ,что анализ aCGH по протоколу выше указанного приказа не является обязательной процедурой программы ВРТ, но в последнее время специалисты ВРТ считают, что aCGH необходим возрастным пациентам от 35 лет до 42-ка, после неудачных попыток ВРТ после 35-ти лет ,а так же наследственной предрасположенностью к генетическим аномалиям в анамнезе . [6]
Моносомия – 33,3%, Трисомия – 50%, Дисомия – 5,5%, Смешанные отклонения – 11,2%
Для статистического обзора использовались данные 27 пациенток, в общей сложности из 45 эмбрионов было обследовано 43, так как у 2 эмбрионов от разных пациенток было низкое качество ДНК, что не позволило провести ПГС.
У 25 (58%) эмбрионов из 43 обследованных генетические отклонения отсутствовали, а почти у половины эмбрионов 18 (42%) были выявлены различные генетические отклонения.
Среди них:
моносомия – 6 эмбрионов (33,3%), трисомия – 9 эмбрионов (50%), дисомия – у 1 эмбриона (5,5%), смешанные отклонения (частичная моносомия длинного плеча хромосомы 2 и трисомия хромосомы 21) – 2 эмбрионов (11,2%). [7]
Почти в половине случаев 42% случаев эмбрионы имели генетические отклонения. Каждый второй эмбрион был подвержен генетическим отклонениям.
Обсуждения:
1.ПГТ является золотым стандартом выявления генетических аномалий на уровне эмбриона.
2.Выборка эмбрионов после ПГТ позволяет врачу репродуктологу с наибольшей вероятностьюполучить имплантацию и в дальнейшем беременность.
3.Финансовая составляющая ПГТ оговаривается с пациентом для диагностики двух и более эмбрионов.не все пациенты соглашаются на проведение исследования как по финансовым соображениям, так и из за заблуждения, что процедура вредна для эмбриона (3%).
4.После проведения процедуры ПГТ у врача репродуктолога в 80% появляется уверенность учспешной имплантации.
Заключение:
1.Предимплантационное генетическое тестирование эмбрионов aCGH показано возрастным парам от 35-ти лет и старше, даже если гаметы использовались односторонне (сперма или ооциты семейной пары ).
2.Генетические аномалии присутствовали и в донорских односторонних программах.
3.Исследования показали, что каждый второй эмбрион генетически не полноценен 42 % исследуемых эмбрионов имели генетические аномалии.
4. Шанс имплантации эмбрионов увеличивался на 58% при применение aCGH.
Список литературы:
1. А.Н. Рыбина, С.Ш. Исенова, В.Н. Локшин – Современные аспекты вспомогательных репродуктивных технологий в мире и в Казахстане 2017 г.Алматы
2. Карр Б., Блэквелл Р., Азиз Р. - "Руководство по репродуктивной медицине" 2015
3.Данные ВОЗ о "Предимплантационном генетическом тестировании (ПГТ) хромосомных аномалий". 2020 г. https://www.who.int/ru
4.В. В. Ладыгина, В. В. Чистяков - "Хромосомный полиморфизм".2018,
5. И. А Брусиловский., И. В Лившиц. Морфологическая оценка эмбрионов человека.Проблемы репродукции. 2018;24(2):63-68.
6.Н. П. Бочков - "Клиническая генетика" 2002,
И. А.,Брусиловский, И. В Лившиц И. В. Морфологическая оценка эмбрионов человека. «Проблемы репродукции». 2018;24(2):63-68.
7.Лебедев И. Н. , Кашеварова А. А. , Скрябин Н. А. , Никитина Т. В. , Лопаткина М. Е. , Мельников А. А. , Саженова Е. А. , Иванова Т. В. , Евтушенко И. Д. - "Матричная сравнительная геномная гибридизация (ARRAY-CGH) в диагностике хромосомного дисбаланса и полиморфизма CNV при анембрионии".2013
REFENCES:
1. A. N. Rybina, S. Sh. Isenova, V. N. Lokshin-Modern aspects of assisted reproductive technologies in the world and in Kazakhstan 2017Almaty
2. Carr B., Blackwell R., Aziz R. - "Guide to reproductive Medicine" 2015
3.WHO data on "Preimplantation genetic testing (PGT) of chromosomal abnormalities". 2020 https://www.who.int/ru
4. V. V. Ladygina, V. V. Chistyakov - "Chromosomal polymorphism".2018,
5. I. A. Brusilovsky., I. V. Livshits. Morphological assessment of human embryos.Problems of reproduction. 2018;24(2):63-68.
6.N. P. Bochkov - "Clinical Genetics" 2002,
I. A., Brusilovsky, I. V. Livshits I. V. Morphological assessment of human embryos. "Problems of reproduction". 2018;24(2):63-68.
7.Lebedev I. N. , Kashevarova A. A. , Skryabin N. A. , Nikitina T. V. , Lopatina, M. E. , Melnikov A. A. , Sazhenova E. A. , Ivanova T. V. , Evtushenko I. D. - "Matrix
